Медицински стручњак за чланак
Нове публикације
Анализа полиморфизма дужине фрагментног фрагмента
Последње прегледано: 23.04.2024
Сви иЛиве садржаји су медицински прегледани или проверени како би се осигурала што већа тачност.
Имамо стриктне смјернице за набавку и само линкамо на угледне медијске странице, академске истраживачке институције и, кад год је то могуће, медицински прегледане студије. Имајте на уму да су бројеви у заградама ([1], [2], итд.) Везе које се могу кликнути на ове студије.
Ако сматрате да је било који од наших садржаја нетачан, застарио или на неки други начин упитан, одаберите га и притисните Цтрл + Ентер.
Широка употреба различитих ограничења ендонуклеазе за анализу хромозомске ДНК открила је огромну варијабилност у људском геному. Чак и мале промене кодирајућих и регулаторних региона структурних гена могу довести до престанка синтезе одређеног протеина или губитка његове функције у људском тијелу, што обично утиче на фенотип пацијента. Међутим, отприлике 90% људског генома састоји се од некодирајућих секвенци који су више варијабилни и садрже многе тзв. Неутралне мутације, или полиморфизме и немају фенотипски израз. Таква полиморфна места (локи) се користе у дијагнози насљедних обољења као генетски маркери. Полиморфни локи су присутни у свим хромозомима и повезани су са одређеним регионом гена. Након утврђивања локализације полиморфног локуса, могуће је утврдити са којим геноном повезати мутацију која је узроковала болест код пацијента.
За изолацију полиморфних региона ДНК користе се бактеријски ензими - ензими за ограничење, чији је производ мјеста рестрикције. Спонтане мутације које се јављају на полиморфним местима чине их отпорним или, обратно, осетљиве на деловање специфичног рестрикцијског ензима.
Мутацијска варијабилност у рестрикционим местима може се открити променом дужине фрагмента ограничених ДНК, сепарацијом их користећи електрофорезу и накнадну хибридизацију са одређеним ДНК сондама. У одсуству ограничења на полиморфном месту, један велики фрагмент ће бити откривен на електрофореграмима, а ако је присутан, присуствоваће се мањи фрагмент. Присуство или одсуство мјеста рестрикције у идентичном локу хомологних хромозома омогућује поуздано означавање мутантног и нормалног гена и прати пренос на потомство. Тако, у проучавању ДНК пацијената, у оба хромозома од којих је место за рестрикцију присутно у полиморфном региону, кратки фрагменти ДНК ће бити откривени на електрофореграму. Код пацијената хомозиготних за мутацију која модификује полиморфно место рестрикције, откривају се фрагменти веће дужине, а код хетерозиготних фрагмената биће идентификовани кратки и дуге фрагменти.
[