Инфективна мононуклеоза: антитела на вирус Епстеин-Барр у крви

Инфективна мононуклеоза је уобичајена системска лимфопролиферативна болест, најчешће узрокована вирусом Епстеин-Барр. Токопласма гондии и други вируси (ЦМВ, вирус хумане имунодефицијенције и хумани херпес вирус тип 6, признати узрок изненадне егзантема) могу узроковати клинички сличне болести. Ови исти етиолошки агенси су вероватно способни да изазову синдром хроничног умора.

Епстеин-Барр вирус је вирус из херпес групе, има тенденцију на Б-лимфоците, дуго траје у ћелијама домаћина као латентна инфекција. Широко је дистрибуиран широм свијета. По структури и величини вирус Епстеин-Барр се не разликује од других херпесвируса, али се значајно разликује од њих у антигенским својствима. Вирус има мембрански антиген (МА-мембрански антиген), нуклеарни антиген (ЕБНА-Епстеин-Баррис нуклеарни антиген) и вирусни капсидни антиген (ВЦА).

Инфекција се јавља када се вирус преноси са пљувачком. Епстеин-Барр вирус када се прогутају инфицира фаринкса епител, изазивајући запаљење и грозницу - типични клинички знаци почело Инфективна мононуклеоза. Строго лимфотропични вирус, улазак С3α рецептор ћелијску мембрану Б лимфоцита индукује пролиферацију поликлонском Б-лимфоцита уз одговарајуће повећање крајника, системски лимфаденопатијом и спленомегалијом. Б-лимфоцити се претварају (стичу способност да бесконачне поделе), а у одсуству адекватног целуларног имуног одговора, овај процес може да еволуира очигледно малигни (нпр Кс-везан лимфопролиферативни синдром). Ако фактори ћелијског имунитета контролишу репликацију Епстеин-Барр вируса у телу, онда клинички симптоми инфективне мононуклеозе постепено нестају.

Као и други херпесвируси, Епстеин-Барр вирус може истрајати у латентном инфекције (његов ДНК садржане у језгра мале количине Б-лимфоцита). Еписодиц асимптоматска реактивирање инфекције - уобичајена појава, око 20% здравих младих излучују вирус Епстеин-Барр вирус са пљувачком. Код особа са оштећеним ћелијског имунитета (нпр АИДС, атаксија-телангиектазија, код прималаца трансплантације) могу развити јасну реактивну инфекцију длакава леукоплакија, интерстицијални пнеумонитис, или у облику моноклонског Б-ћелијски лимфом. Са Епстеин-Барр вирус је повезан етиологију назофаринкса карцинома и Буркитовог лимфом.

Једна од манифестација инфективне мононуклеозе је појављивање у периферној крви атипичних лимфоцита (до 10% укупног броја лимфоцита). Атипични лимфоцити се налазе у крви од почетка периода клиничких манифестација инфекције. Њихов садржај у крви достигне врхунац крајем другог или почетком треће недеље и може задржати на овом нивоу до 1,5-2 месеца, а комплетан нестанак се обично јавља до почетка четвртог месеца од појаве болести. Присуство атипичних лимфоцита је релативно неосетљив знак инфекције изазваног Епстеин-Барр вирусом, али има укупну специфичност од око 95%.

Пролиферација поликлонском Б-лимфоцита у инфекцију изазваних Епстеин-Барр вирус, ствара велики избор аутоантитела у пацијента, као што је ИгМ-анти-и (хладног аглутинина), реуматоидни фактор, антинуклеарна антитела. Најнеобичнији од Иг, која се појављује у заразне мононуклеозе, називају се хетеропхиле антитела Паул-Буннелиа. Ова антитела припадају класи ИгМ, имају афинитет за јањетине и коњским црвених крвних ћелија, нису усмерени на било антиген Епстеин-Барр вирус. Хетеропхилиц антитела - Рандом производи Б-лимфоидног пролиферације (узрокована вирусом Епстеин-Барр), оне се појављују у првој недељи инфективног мононуклеозу и постепено нестају током опоравка, оне обично нису детектовани у 3-6 месеци.

Како почетна акутна фаза инфекције постаје латентна, геноми Епстеин-Барр вируса (јединствени антигени) се појављују у великом броју у свим ћелијама, а нуклеарни антиген се пушта у животну средину. Као одговор на антиген, специфична антитела се синтетизују - вредни маркери стадијума болести. Убрзо након инфекције Б лимфоцита откривен је рани антиген (ЕА), протеин потребан за репликацију вируса Епстеин-Барр (а не структурална вирусна компонента). До раног антигена у телу пацијента синтетишу се антитела класа ИгМ и ИгГ. Заједно са потпуном вирусном вирусом Епстеин-Барр појављују се антигени вирусног капсида (ВЦА) и мембранског антигена (МА). Би се инфекција смирила мали проценат инфициране вирусом Епстеин-Барр вирус у лимфоцитима имуног избегава деградацију и одржава вирусни геном у латентном облику. Нуклеарни антиген (ЕБНА) вируса Епстеин-Барр одговоран је за његово дуплирање и опстанак.

Лабораторијски тестови могу открити антитела различитим антигеном.

Од серолошких метода дијагностиковања заразне мононуклеозе, реакција Паул-Буннел (аглутинација) је најчешћа, са циљем откривања хетерофилних антитела у серуму. Титар хетерофилних антитела 1: 224 и више у серуму пацијента је препознат као дијагностички значајан, потврђујући дијагнозу инфективне мононуклеозе. Хетерофилна аглутинација је позитивна код 60% младих након 2 недеље и 90% после 4 недеље од појаве клиничких манифестација болести. Због тога је потребно неколико студија за дијагнозу инфективне мононуклеозе: током прве седмице болести (реакција може бити негативна) и 1-2 недеље касније (реакција може постати позитивна). Садржај хетерофилних антитела се смањује након завршетка акутног периода инфективног процеса, али њихов титар се може одредити у року од 9 месеци од појаве клиничких симптома. Реакција Паул-Буннел-а може се претворити са позитивног на негативан, чак и са позадином преосталих хематолошких и клиничких симптома код пацијента. Осетљивост методе код одраслих је 98%, специфичност је 99%. Код деце са инфективном мононуклеозом пре 2 године старости, хетерофилна антитела се могу открити само код 30% пацијената, у доби од 2-4 године - у 75%, преко 4 године - у више од 90%. Сензитивност методе код деце је мања од 70%, специфичност је 20%. Редукција, а затим поновно повећање титра хетерофилних антитела може се јавити као одговор на другу инфекцију (најчешће код вирусних инфекција горњег респираторног тракта). Реак Паул-Буннел није специфичан за Епстеин-Барр вирус. Титар хетерофилних антитела не даје унакрсну реакцију и не доводи у везу са специфичним антителима на Епстеин-Барр вирус, нити сравњава с тежином курса болести. Тест је бескористан за дијагностицирање хроничног облика инфективне мононуклеозе (позитивно у просеку само код 10% пацијената).

Титри 1:56 или мање се могу наћи код здравих људи и код пацијената са другим болестима (реуматоидни артритис, рубела). Лажно позитивни резултати тестова су врло ретко испуњени.

У овом тренутку, метод "јединствене тачке" (слиде агглутинатион) се користи за одређивање антитела на еритроците овна, он се иницијално користи као тест скрининга. По сензитивности, он је упоредив са Паул-Буннеловом реакцијом. Слиде лажно позитивних тестова може бити око 2% од студија (леукемије, малигни лимфом, маларије, рубеоле, вирусни хепатитис, карцином панкреаса) и лажно негативних одрасле - 5-7% случајева.

Треба напоменути да је спектар система дијагностичких тестова које производе фирме на основу одређивања титра антитела веома широк, па је потребно фокусирати на дијагностички титер антитела назначених у упутствима за тестне системе.

Уколико хетеропхиле антитела нису идентификовани, а клиничка слика одговара инфективни мононуцлеосис, неопходно је испитати серум за специфичним антителима из ИгМ и ИгГ. За детекцију специфичних антитела на Епштајн-Барр вирус применом индиректне методе имунофлуоресцентних (дозволи да открије антитела на ВЦА и ЕА антигене) антиалекин-имунофлуоресценције (детектују антитела на ЕА, ВЦА и ЕБНА антигена) и ИФА.

Антитела на ЕА антиген Д компоненту (анти-ЕА-Д) појављују се чак иу латентном периоду примарне инфекције и брзо нестају уз опоравак.

Антитела на компоненту ЕА антигена Р (анти-ЕА-Р) могу се открити 3-4 недеље након клиничких манифестација болести. Они су присутни у серуму крви око годину дана, често се детектују са атипичним или дуготрајним токовима инфективне мононуклеозе. Обично се ова антитела налазе код Буркитовог лимфома.

Антитела на ВЦА класе ИгМ (анти-ВЦА ИгМ) појављују се веома рано, обично клиничким симптомима, откривени су на почетку болести у 100% случајева. Високи титри се јављају на 1-6 недељу од појаве инфекције, почињу да се смањују од треће недеље и обично нестају након 1-6 месеци. Анти-ВЦА ИгМ је скоро увек присутан у серуму са активном инфекцијом, тако да је метод њиховог детекције веома осетљив и специфичан за акутну епизоду инфективне мононуклеозе.

Антитела на ВЦА класе ИгГ (анти-ВЦА ИгГ) могу се појавити рано (у 1-4 седмици), њихова количина достигне врхунац до 2. Месеца болести. На почетку болести, налазе се у 100% случајева. Само 20% пацијената је показало 4-пута повећање титра у испитивању упарених серума. Титар се смањује уз опоравак, али се налази у року од неколико година након инфекције, због чега је бескорисно за дијагнозу инфективне мононуклеозе. Присуство анти-ВЦА ИгГ показује стање након инфекције и имунитета.

Антитела на ЕБНА (анти-ЕБНА) се појављују касније од свих, ријетко су присутна у акутној фази болести. Њихов садржај се повећава током периода опоравка (у року од 3-12 месеци), они могу да наставе у крви много година после болести. Недостатак анти-ЕБНА у присуству анти-ВЦА ИгМ и анти-ЕА ИгМ указује на тренутну инфекцију. Детекција анти-ЕБНА након раније негативне реакције указује на постојећу инфекцију. Када се користи ЕЛИСА метода, могуће је истовремено открити присуство анти-ЕБНА класа ИгМ и ИгГ. Ако је количина анти-ЕБНА ИгМ већа од анти-ЕБНА ИгГ, треба узети у обзир акутну инфекцију, при чему је обрнути однос претходни.

У корист акутне примарне инфекције, један или више од следећих симптома указују на присуство:

• анти-ВЦА ИгГ (откривен рано, а касније и садржај је смањен);
• Висок титар (више од 1: 320) или 4 пута повећање титра анти-ВЦА ИгГ током током болести;
• пролазни пораст титра анти-ЕА-Д (1:10 или више);
• рани анти-ВЦА ИгГ без анти-ЕБНА, а касније и појава анти-ЕБНА.

Акутна или примарна инфекција узрокована вирусом Епстеин-Барр је искључена ако се анти-ВЦА ИгГ и анти-ЕБНА титри у серуму не мењају када се тестирају у динамици (акутни период и опоравак).

Константно присуство раних антигена и анти-ВЦА ИгГ у високим титрима указује на хроничну фазу инфекције.

Детекција антитела на Епстеин-Барр вирус се користи за дијагнозу инфективне мононуклеозе и хроничних инфекција узрокованих вирусом Епстеин-Барр.

Антитела на вирус Епштајн-Барр може детектовати у следећих болести: секундарне имунодефицијенције, укључујући ХИВ инфекцију, назофаринкса карцином, Буркитовог лимфом, ЦМВ инфекција, сифилиса, Лајмске болести, бруцелозе и других.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]