Медицински стручњак за чланак
Нове публикације
Саутерн блотинг
Последње прегледано: 05.07.2025
Сви иЛиве садржаји су медицински прегледани или проверени како би се осигурала што већа тачност.
Имамо стриктне смјернице за набавку и само линкамо на угледне медијске странице, академске истраживачке институције и, кад год је то могуће, медицински прегледане студије. Имајте на уму да су бројеви у заградама ([1], [2], итд.) Везе које се могу кликнути на ове студије.
Ако сматрате да је било који од наших садржаја нетачан, застарио или на неки други начин упитан, одаберите га и притисните Цтрл + Ентер.
Саутерн блотинг (развили су га Е. Саутерн и Р. Дејвис 1975. године) је главна метода која се тренутно користи за идентификацију гена за одређену болест. Да би се то урадило, ДНК се екстрахује из ћелија пацијента и третира једном или више рестрикционих ендонуклеаза. Добијени фрагменти се подвргавају електрофорези, што омогућава њихово раздвајање по величини (мањи фрагменти се брже крећу кроз поре гела). Фрагменти се затим преносе (поново штампају) на нитроцелулозни филтер, на који се наноси радиоактивно обележена сонда. Сонда се везује само за комплементарну секвенцу. Затим се, коришћењем ауторадиографије, одређује положај жељеног фрагмента геномске ДНК на електроферограму.
Хибридизација са обележеном ДНК сондом препарата ДНК или РНК нанетих кап по кап на чврсту матрицу без претходне рестрикције и електрофорезе назива се тачкаста или слот хибридизација, у зависности од конфигурације ДНК тачке на филтеру (округла или дугуљаста, респективно).
[