Витамин А у крви

Референтне вредности (нормални) нивои витамина А (ретинол) у крвном серуму: дети 1-6 лет - 0.7-1.5 мол / Л, 7-12 - 0,91-1,71 ммол / л, 13 -19 година - 0,91-2,51 μмол / л; код одраслих је 1,05-2,09 мол / л.

Витамин А се односи на липосолубилна и постоји у два облика - стварног витамин А или ретинол (наћи само у производима животињског порекла) и провитамин А, позната као каротен (припремљено од животињског или порекла биљног), која може бити конвертована у ретинолом у зидовима дигестивни тракт. Приближно 50-90% ретинола долазног хране апсорбује у танком цреву и транспортују у хиломикронима повезаних са комплексом јетре, где се чува у облику ретинол палмитат. Ако је неопходно, он се издаје у крвоток у облику ретинола, који је у комбинацији са витамином А везујући протеин. У серуму, комплекс витамина А везујући протеин + ретинол се везује за транстиретин. Од серума, ретинол је заробљен циљним ћелијама, као што су ретине фоторецептори и епителијум.

Када тело витамина А у износу који прелази захтеве (180-430 микрограма ретинол дневно у зависности од старости, полу и физиолошког стања), његова вишак у јетри депонована су формирање депоа овог витамина. Уз смањени унос ретинола из хране, складиштење јетре се пушта у крвоток, одржавајући концентрацију ретинола у серуму на нормалном нивоу (изнад 0,7 μмол / Л). Друге биолошки активне форме витамина А (ретинална и ретиноинска киселина) присутне су у крви у веома ниским концентрацијама (испод 0,35 μмол / Л); на естрима ретинола чини око 5% укупног витамина А (0,1-0,1 μмол / л).

Витамин А има важну улогу у процесима смањења оксидације. Ретинол промовише формирање гликогена у јетри и мишићима, побољшава холестерола у крви је укључен у синтезу стероидних и полних хормона. Неопходно је раст и формирање кости скелета доказано ресинтезом родопсину, а такође доприноси нормално функционисање слузокоже и епитела поклопца коже, спречава његово метаплазију, хиперкератозом и претерану Одлубљивање. Витамин А помаже у ојачавању косе, зуба и десни. У последњих неколико година, показује разноврсну улогу витамина А у превенцији рака и регулацију имунитета (битног за завршетак фагоцитозе, повећавају синтезу Иг, стимулише производњу убица Т ћелија, стимулише типа Т-хелпер ИИ и др.). Витамин А - активни антиоксидант, који делује углавном у присуству витамина Е; штити витамин Ц од оксидације. Недостатак витамина А сматра се фактором ризика за малигне неоплазме. У експерименталним студијама показано је да повећање садржаја витамина А у исхрани повећава средњи животни вијек за 17,5%. Цинк је суштински кофактор метаболизма витамина А (потребан за синтезу витамина А везујућег протеина).

Просечна дневна Услов за ретинол одрасле (20-50 година) је 1,2 мг (4,000 ИУ, 1 ИУ је еквивалентно 0,3 микрограма ретинол) за труднице - 1.5 мг (5000 ИУ) за дојење - 1, 8 мг (6000 ИУ), за људе преко 60 година - 2,5 мг (10.000 ИУ). Најмање трећина дневног захтева ретинола треба доставити тијелу у готовом облику; остатак се може апсорбовати употребом каротеноида, од којих се ретинол формира у телу. Треба имати на уму да око 30% ретинола у прехрамбеним производима уништава топлотним третманом. Активност ретинола је 2 пута већа од каротена, а осим тога, само 30-40% се апсорбује у црево. Због тога се у процени уноса прехране сматра да 1 мг ретинола приближно одговара 6 мг каротеноида.

Одређивање ретинола (витамин А) и каротеноида у серуму према Бессеи-у у модификацији ЛА Анисимова

Принцип методе

Одређивање витамина А и каротеноида базирано је на њиховој хидролизи у алкалном раствору алкохола, након чега следи екстракција са смешом органских растварача.

Реагенси

• 11 М раствора калијум хидроксида (КОХ).
• 96% етил алкохол.
• 1 М раствор калијум хидроксида (КОХ) у 96% етил алкохола: 1 запремина 11 М раствора КОХ се помеша са 10 запремина 96% етил алкохола. Реагенс је припремљен на дан студије. Ако се током мешања дође до бојења, алкохол се мора очистити дестилацијом пре употребе.
• Ксилол, хп.
• Октан, х.цх.
• Смеша ксилен-октана: припремљена мешањем једнака запремина ксилена и октана.

Испитивања се спроводе на спектрофотометру.

Ток утврђивања витамина А

Крв с прста (око 1 мл) се додаје на етикету центрифуге и ставља се у стаклену чашу топлом водом (температура 40-45 ° Ц) 20-30 минута. Да би се одвојио серум, крвни зглоб се пажљиво завоји око ивице цеви танким стакленим штапом и центрифугира се на 3000 о / мин током 10 минута.

Изабрати 0,12 мл серума и пребацити у аглутинациону епрувету, а затим додати 0,12 мл 1 М раствора алкохола калијевог хидроксида. Садржај се потреса темељито.

Тестне цеви с сондама постављају се у водено купатило 20 минута на температури од 60 ° Ц за хидролизу.

Узорци се охладе и додају се 0,12 мл ксилен-октанске смеше, снажно стресају 10-15 секунди. Опет се охлади и центрифуга.

Пажљиво уклоните горњи слој који садржи витамин А и каротеноиде са пипетом Пастеур са гуменом посудом и пренесите је на микро-цветове.

Узорци су спектрофотометријски на таласној дужини од 328 нм - за одређивање витамина А и на таласној дужини од 460 нм - за одређивање каротеноида.

Након спектрофотометрије испитиваних узорак подвргнута ултраљубичастом зрачењу за уништавање витамина А. За ову сврху, на удаљености од 15-20 цм од кварцне мицроцуветтес сет (бактерицидни) лампом тако да зрачење изложена дела кивету, испуњена течношћу; време зрачења је 45-60 минута.

Узорци су више пута спектрофотометријски на таласној дужини од 328 нм. Садржај витамина А се одређује из разлике у вредности екстинкције (оптичка густина), узимајући у обзир коефицијент (фактор) 637, израчунат од стране Бессеи за витамин А.

Обрачун се врши према формули:

Кс = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Где је Кс садржај витамина А, μг / дЛ; 637 је коефицијент који је израчунао Бессеи за одређивање витамина А; Е328 (1) - оптичка густина раствора пре зрачења; Е328 (2) је оптичка густина раствора након зрачења.

Коефицијент преноса концентрације витамина А из μг / дЛ у μмол / л је 0,035.

Садржај каротеноида израчунава се према формули:

Кс = 480-Е480,

Где је Кс садржај каротеноида, μг / дЛ; 480 је коефицијент који је израчунао Бессеи за одређивање каротеноида; Е480 је оптичка густина тестног раствора.

Напомена:

Према Бессеи-у, током студија се могу узимати већи или мањи серумски волумени, али његов однос према волумену алкохолног раствора треба бити константан са било којом промјеном запремине (количине) ксилен-октанске смеше.

Норма у садржају витамина А у крвном серуму је: код новорођенчади и дојенчади - 160-270 μг / л; код одраслих, 1,05-2,45 μмол / л (300-700 μг / л). Садржај каротеноида у одраслом серуму је 800-2300 μг / л.