Дијагноза акутне лимфобластне леукемије

Дијагноза акутне лимфобластне леукемије заснована је на историји, физичком прегледу и лабораторијским истраживањима.

Лабораторијска дијагностика

Општа крвна слика: број бијелих крвних зрнаца може бити нормалан, смањен или повишен; често, мада не увек, откривају експлозивне ћелије; Карактеристична су хипорегенеративна нормохромна анемија и тромбоцитопенија.

Биохемијски тест крви: карактерише повећање активности ЛДХ; такође одређују индикаторе функције бубрега и јетре.

Миелограм: медуларна пункција потребно да се изврши најмање две тачке (код деце испод 2 године старости је пета кости или припоја за тибију, старија деца - позади и напред илијачни кичме), да прикупи довољан број дијагностичких материјала. Пожељно је узимати материјални унос под општом анестезијом. Потребно је направити 8-10 размаза из сваке тачке, а такође сакупљати материјал за имунофенотипинг, цитогенетске и молекуларно-генетске студије.

Цереброспиралне пунцтуре - обавезно дијагностички манифестација одржава у специјализованим терминима седације и у присуству тромбоцита у периферној крви у износу од најмање 30 000 л (ако је потребно пре него што пункција врши тромбоцита трансфузије). За припрему цитопрепарације потребно је најмање 2 мл цереброспиналне течности.

Инструментална дијагностика

Пожељно је (и ако постоји неуролошка симптоматологија - нужно) ЦТ мозга.

Ултразвучни преглед омогућава утврђивање величине инфилтрираних паренхиматозних органа и увећаних лимфних чворова абдоминалне шупљине, мале карлице и ретроперитонеалног простора, величине и структуре тестиса.

Радиографија грудног коша може открити повећање медијастина, ексудативни плеуриси. Радиографија костију и зглобова се врши према индикацијама.

Да би појаснили дијагнозу и искључили срчану болест, провели електрокардиографију и ехокардиографију. Приказани су консултације окаулиста, оториноларинголога (испитивање дна ока, адексалних синуса носу).

Специјалне дијагностичке методе

Дијагноза акутне лимфобластне леукемије базирана је на процени туморског супстрата - коштане сржи, цереброспиналне течности.

Цитолошки преглед коштане сржи омогућава детекцију хиперцелуларности, сужење бактерија нормалне хематопоезе и инфилтрација од стране моћних ћелија - од 25% до потпуне замене коштане сржи са тумором.

Морфолошки сличност малигних лимпхобластс и нормалне родитељских ћелија захтева одређивање процента лимпхобластс у коштаној сржи брисева замрљаног према Романовски-Гимза. Морфолошка класификација акутне лимфобластном леукемије, према критеријумима групи ФАБ (Френцх-Америцан-британска цооперативе гроуп), даје на основу утврђивања величине структуре језгра, присуство инклузије и друге функције јединица бластс групе Л1, Л2 и Л3 од 90% акутном лимфобластном леукемијом дјеца припадају варијанте Л1, 5-15% - у Л2, мање од 1% - до Л3. Тренутно, акутна леукемија са матуре Б-фенотип (Л3) припада групи не-Ходгкин-овог лимфома (у овом одељку, ова опција се не сматра).

Цитокемијско истраживање је следећа обавезна фаза дијагнозе. Уз помоћ цитокемијских боја, откривено је чланство ћелија до одређене линије диференцијације. Обавезно бојење за мијелоперокидазу (реакција ћелија која припадају лимфидној линији диференцијације је негативна). Сцхицкова реакција на гликоген помаже у диференцирању лимфоидних експлозија услед карактеристичне грануларне боје цитоплазме. Боја Судан црна је позитивна у миелоичким ћелијама са типичним распоредом гранула. Кисел фосфатаза се детектује у Т-ћелијској леукемији.

Имунофенотипизација је једно од главних истраживања која одређује целуларност популације експлозије и прогнозу болести. Специфични површински и цитоплазмични антигени Т и Б лимфоцита користе се као маркери за идентификацију, одређивање порекла и стадијум диференцијације лимфоидних ћелија. Коришћењем панела моноклонских антитела на кластере диференцијације и одређивањем процента њиховог изражавања у ауторитативној популацији омогућава се индицирају ли клон леукемије у датом пацијенту припада линији Т или Б. Резултати имунофенотипинга империјалних ћелија, према модерној класификацији, засновани су на дијагнози акутне лимфобластне леукемије.

Цитогенетичке и молекуларне генетичке методе су се у последњих неколико година широко примењивале на истраживање ћелија леукемије. Методе омогућавају процену стања апарата за хромозом - број хромозома и њихових структурних промјена (транслокације, инверзије, брисања). Цитогенетичке абнормалности и ДНК индекс (однос количине ДНК у леукемијским ћелијама и ћелијама са нормалним диплоидним кариотипом) су значајни прогностички фактори. Детекција клоналних аномалија карактеристичних за туморске ћелије овог пацијента омогућавао је пратити број ових ћелија у динамици болести на молекуларном генетичком нивоу и одредити минималну популацију ћелија резидуа. Идентификација и молекуларна карактеризација гена, регулација или функција која се могу оштетити као резултат хромозомских промена, доприноси разумевању молекуларне основе малигне трансформације.

Важан прогностички фактор је процена минималне резидуалне болести. То јест, процена количине резидуалних ћелија леукемије код пацијента у ремисији. Детекција Техника минималне резидуалне болести садржан у дефиницији са абнормалним кариотип ћелијама цитогенетичких технике (може детектовати аномалију ћелије 100 нормално) или ланчане реакције полимеразе (ПЦР омогућава да открије патолошких ћелија од 10 ⁵ нормалног). Врло осетљива метода је цитофлуориметрија тока, која омогућава детекцију ћелија са абнормалним имунофенотипом. Висок ниво минималне резидуалне болести након индукције ремисије или пре терапије одржавања корелира са лошом прогнозом.

Прогностички фактори исхода акутне терапије лимфобластне леукемије

Фактори	Повољан изглед	Нежељена прогноза
Старост	Старији од 1 године и испод 9 година	Млађи од 1 године и старији од 9 година
Сек	Женска	Мушко Женско
Леукоцитоза	<50 000 у μЛ	> 50 000вмкл
ДНК индекс	> 1,16	<1.16
Број хромозома у империјалним ћелијама	> 50	<45 (посебно 24-38)
Одговор на 8. Дан лечења	Нема експлозија у крви	У крви има експлозија
ЦНС-статус	ЦНС1	ЦНС 2 или ЦНС 3
Цитогенетика	Трисомија (+4) или (+10)	Т (4; 11), т (9; 22)
Молекуларна генетика	Тел / АМЛ1	Реаранжировка МLL
Имунофенотип	Б-прекурсори	Т-ћелија

• ЦНС је централни нервни систем.
• ДНК - деоксирибонуклеинска киселина.
• ЦНС 1 - одсуство експлозивних ћелија у ЦСФ.
• ЦНС 2 - експлозивне ћелије у ЦСФ у одсуству цитозе (<5 ћелија у μЛ).
• ЦНС 3 - експлозивне ћелије и цитоза у ЦСФ (£ 5 ћелија у μЛ).

Неуролеукемија

Леукемије ћелије може ући у ЦНС са системску циркулацију, миграција кроз венској ендотела и тачкастог крварења (дубоко тромбоцитопеније у време дијагнозе болести повезане са високе фреквенције неуролеукемиа). Алтернативни хипотеза, леукемије ћелије може ширити директно из коштане сржи костију лобање у субдуралном простор иу ЦНС стране адвентицију венула и нервних мембрана. Познавање одређеног пенетрације ћелија механизма могу имати клиничку примену: у случају директног пенетрације коштане сржи у ЦНС је најефикаснија локално лечење, не само лобање зрачења, већ интратекална хемотерапија. У случају ширења ћелија леукемије из системског циркулације, системска полихемотерапија игра већу улогу. Механизам тумора инфилтрације ћелија у ЦНС зависи од врсте леукемије ћелија пребројавања у системску циркулацију и присуству синдрома хеморагичне, старост пацијента и зрелости крвно-мождану баријеру. У централном нервном систему, већина туморских ћелија је ван митолошког циклуса, ове ћелије могу дуго трајати у ЦСФ-у - на десетине година. Присуство само једне експлозивне ћелије у 1 μл цереброспиналне течности значи да је број ових ћелија у целом цереброспиналном простору најмање 10 ⁵

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]