Имунолошке методе дијагностике наследних болести

Недавно се главни комплекс хистокомпатибилности - HLA (хумани леукоцитни антигени) сматра важним имунолошким маркером популационе генетике. Антигени овог система се имунолошки одређују у леукоцитима крви. Генски комплекс HLA је компактно смештен на кратком краку хромозома 6 (6p21.3). Локализација овог система и обим његових локуса на хромозому омогућили су нам да израчунамо да комплекс чини приближно 1/1000 генског фонда организма. Антигени хистокомпатибилности учествују у регулацији имуног одговора организма, у одржавању имуне хомеостазе. Због свог полиморфизма и компактне локализације HLA антигена, стекли су велики значај као генетски маркер.

Тренутно је откривено више од 200 алела овог система; то је најполиморфнији и биолошки значајнији од генетских система људског тела. Поремећаји различитих функција главног комплекса хистокомпатибилности доприносе развоју низа болести, пре свега аутоимуних, онколошких и инфективних.

Према локацији HLA комплекса на хромозому 6, разликују се следећи локуси: D/DR, B, C, A. Нови локуси G, E, H, F су откривени релативно недавно; њихова биолошка улога се тренутно активно проучава. У главном комплексу хистокомпатибилности разликују се три класе антигена. Антигени класе I су кодирани локусима A, B, C. Нови локуси такође припадају овој класи. Антигени класе II су кодирани локусима DR, DP, DQ, DN, DO. Гени класе I и II кодирају трансплантационе антигене. Гени класе III кодирају компоненте комплемента (C2, C4a, C4b, Bf), као и синтезу изоформи низа ензима (фосфоглукомутаза, гликоксилаза, пепсиноген-5, 21-хидроксилаза).

Присуство Аг повезаног са одређеном болешћу код особе нам омогућава да претпоставимо повећану предиспозицију ка овој патологији, а у неким корелацијама, напротив, отпорност на њу.

Одређивање антигена HLA система врши се на лимфоцитима изолованим из периферне крви коришћењем хистотипизационих серума у микролимфоцитотоксичној реакцији или молекуларно-генетским методама.

Успостављање асоцијативних веза између болести и антигена главног комплекса хистокомпатибилности омогућава:

• идентификовати групе са повећаним ризиком од развоја болести;
• одредити његов полиморфизам, односно идентификовати групе пацијената са карактеристикама тока или патогенезе болести; у том смислу, може се спровести анализа синтропије болести, идентификујући генетске предуслове за комбинацију различитих облика патологије; повезаност са антигенима који одређују отпорност на болести омогућава идентификацију појединаца са смањеним ризиком од развоја ове патологије;
• спровести диференцијалну дијагностику болести;
• одредити прогнозу;
• развити оптималну тактику лечења.

Пошто већина болести нема директну везу са антигенима главног комплекса хистокомпатибилности, предложена је теорија „два гена“ како би се објаснила повезаност између болести и HLA антигена. Према овој теорији, постоји ген (гени) имуног одговора (Ir ген) који је уско повезан са HLA антигенима и генима који регулишу имуни одговор. Заштитници гена одређују отпорност на болести, а провокативни гени одређују осетљивост на одређене болести.

Релативни ризик од болести за особе са одговарајућим генотипом израчунава се помоћу формуле: x = [h _p × (1 - h _c )] / [h _c × (1 - h _p )], где је h _p учесталост особине код пацијената, а h _c учесталост код особа у контролној групи.

Релативни ризик показује величину повезаности болести са одређеним Ag/Ag HLA система (даје представу о томе колико је пута већи ризик од развоја болести у присуству Ag у поређењу са његовим одсуством). Што је овај индикатор виши код пацијента, то је већа асоцијативна веза са болешћу.

Повезаност људских болести са HLA-Ag (учесталост гена, %)

Болести	ХЛА	Контролна група,%	Болесни,%	Релативни ризик
Реуматологија
Анкилозни спондилитис	Б27	5-7	90-93	90-150
Рајтеров синдром	Б27	6-9	69-76	32-49,6
Артритис изазван инфекцијама:
- Јерсинија	Б27		58-76	17,59
- Салмонела	Б27		60-69	17,57
Псоријатични артритис	Б13		9-37	4,79
Реуматоидни артритис	Дв4	12-19	48-72	3,9-12,0
	ДР4	20-32	70	4,9-9,33
Бехчетов синдром	Б5	13	48-86	7,4-16,4
СКВ	Б5		11-34	1,83
	Б8		19-48	2.11
	Бв15	6-10	21-40	5.1
	ДР2	26,4	57,1	3,80
	ДР3	22.2	46,4	2,90
Гужеро-Шегренов синдром	Б8		38-58	3.15
	Дв3	26	69-87	19,0
Кардиологија
ИБС	Б7	27,8	45,8	2.19
	Б14	7,5	14,8	2.14
	Б15	11.1	20,4	2,05
	Cw4	18,7	32,8	2.12
Хипертензија	Б18	10.4	22,6	2,52
	Ав19	12.6	28,3	2,74
Ендокринологија
Дијабетес типа 1	Б8	32	52-55	2,1-2,5
	Б18		5-59	1,65
	Б15	12	18-36	1,89-3,9
	Дв3	26	48-50	2,9-3,8
	Дв4	19	42-49	3,5-3,9
	ДР3 ДР3/ДР4	20	60	6.10 33
Хипертиреоза	Б8	21	35-49	2,34-3,5
	Д3	26	61	4.4
	ДР3	20	51	4.16
Субакутни тироидитис (де Кервенов)	Бв35	13	63-73	16,81
	Дв1		33	2.1
Адисонова болест	Б8		20-80	3,88-6,4
	Дв3	26	70-76	8,8-10,5
Иценко-Кушингов синдром	А1		49	2,45
Гастроентерологија
Пернициозна анемија	Б7	19	26-52	1,7-3,1
	ДР5	6	25	5.20
Атрофични гастритис	Б7		37	2,55
Пептични чир на дванаестопалачном цреву	А2	48,1	61,3	1,7
	А10	20,6	63,3	6,65
	Б14	4.0	10.3	2,76
	Б15	6.6	24,4	4,56
	Б40	9,72	23,3	2,82
Аутоимуни хепатитис	Б8	16	37-68	2,8-4,1
	ДР4	24	71	7,75
Носиоци HBsAg-а	Бв41		12	11.16
	Б15		10-19	0,29

Болести	ХЛА	Контролна група,%	Болесни,%	Релативни ризик
Дерматологија
Псоријаза	Бв17	6-8	22-36	3,8-6,4
	Б13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Бв16	5	15	2,9
Херпетиформни дерматитис	Б8	27-29	62-63	4,00-4,6
	ДР3	19	80	16,60
Склеродерма	Б7	24	35	1,7
Пемфигус	А10			3.1
Атопијски дерматитис	Б13	6,86	21.28	3,67
	Б27	9,94	25,53	3.11
	А10/Б13	0,88	8.51	10.48
Екцем	А10	19,64	36,67	2.37
	Б27	9,94	26,67	3.29
Уртикарија и Квинкеов едем	Б13	6,86	21,21	3,65
	Б5.8	1,42	12,12	9,57
	Б5.35	0,71	6.06	9.02
Неурологија
Мултипла склероза	А3	25	36-37	2,7-2,8
	Б7	25-33	36-42	1,4-2,0
	Дв2	16-26	60-70	4.3-12.2
	ДР2	35	51,2	1,95
	ДР3	20	32,5	1,93
Мијастенија	Б8	21-24	52-57	3,4-5,0
	А1	20-25	23-56	3,8
	ДР3	26	50	2,5
Пулмологија
Бронхијална астма (код пацијената старости 19-30 година)	Б21	4,62	12,5	2,95
	Б22	9,94	19,64	2.22
	Б27	12.31	37,5	4.27
	Б35	0,11	5.36	51,4
	Б27/35	0,47	7.14	16.2
Друге болести
Вазомоторни ринитис	А3	26,98	52,38	2,98
	Б17	7,57	28,57	4,88
	А3/10	2,72	23,83	11.18
	Б7/17	0,47	9.52	22.28

Подаци приказани у табели показују да су најјаче асоцијативне везе пронађене код болести са полигеним или мултифакторским типом наслеђивања.

Дакле, одређивање антигена главног комплекса хистокомпатибилности на крвним ћелијама (леукоцитима) омогућава нам да идентификујемо степен индивидуалне предиспозиције особе ка одређеној болести, а у неким случајевима користимо резултате истраживања за диференцијалну дијагностику, процену прогнозе и избор тактике лечења. На пример, детекција HLA-B27 антигена се користи у диференцијалној дијагностици аутоимуних болести. Открива се код 90-93% пацијената кавкаске расе са анкилозним спондилитисом и Рајтеровим синдромом. Код здравих представника ове расе, HLA-B27 антигени се детектују само у 5-7% случајева. HLA-B27 антигени се често детектују код псоријатичног артритиса, хроничних инфламаторних болести црева које се јављају са сакроилиитисом и спондилитисом, увеитиса и реактивног артритиса.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]