Вирус хепатитиса А.

Вирусни хепатитис А је инфективна болест човека коју карактерише доминантно оштећење јетре и манифестује се клинички интоксикација и жутица. Вирус хепатитиса А је 1973. Године открио С. Феинстон (и други) користећи методу имунске електронске микроскопије и инфицирањем мајмуна - шимпанза и мармозета. Суштина методе имунолошке електронске микроскопије је да се специфичним антителима (серум опоравка) додаје у филтрат фецеса пацијента са хепатитисом А, а талог је подвргнут електронској микроскопији. Због интеракције вируса са специфичним антителима, они подлежу специфичној агрегацији. У овом случају их је лакше детектовати, а агрегација под утицајем антитела потврђује специфичност патогена. Откриће С. Фајнстона потврдјено је у експериментима на волонтерима.

Вирус хепатитиса А има сферни облик, пречник вириона је 27 нм. Геном представља једноланчну позитивну РНК са масом од 2.6 МД. Суперцапсид је одсутан. Тип симетрије је кубични - икосаедер. Капсид има 32 капсомера, формиран је са четири полипептида (ВП1-ВП4). Својим својствима вирус вируса хепатитиса припада роду Хепарновирус, фамилији Пицорнавиридае. Антигенски вирус хепатитиса А (ХАВ - хепатитис А вирус) је хомоген. ХАВ се добро умножава у телу шимпанза, бабуна, хамадрила и коцкарских мајмуна (мармозета). Дуго се вирус није могао култивисати. Само у осамдесетим. Било је могуће добити ћелијске културе у којима се ХАВ пропагира. У почетку су коришћене трансплантиране линије бубрега рхесус мајмуна (култура ФРхК-4), а сада - трансплантирана линија бубрежних ћелија зелених мајмуна (култура 4647).

Према препорукама стручњака СЗО, усвојена је следећа номенклатура маркера вируса хепатитиса А: антитела на хепатитис А вирус-НАУ на хепатитис А вирус: анти-НАВ ИгМ и анти-НАВ ИгГ.

ХАВ су мале честице пречника 27-30 нм, које имају икозодерску симетрију и поседују хомогеност. На образу дифракције електрона, добијеним методом имунолошке агрегације, откривене су електронско-густе честице са површно позиционираним симетрично распоређеним капсомима. Са негативним контрастом, у препаратима се откривају и комплетне и празне честице. Нуклеоцапсид НАВ, за разлику од грипа, нема површинске избочине и мембране. Такође је важно да вирион ХАВ нема срчане структуре.

Према физичко-хемијским својствима вирус хепатитиса А се односи на породицу Пицорнавиридае, рода Ентеровирус са атомским бројем 72. Међутим, ово таксономиа је сувише необично, а који је пронашао је могуће да напусти терминологију "хепатитис А вирус".

Као и сви вируси породице Пицорнавиридае, вирус хепатитиса А садржи рибонуклеинску киселину. Неке лабораторије су показале могућност клонирања генома вируса хепатитиса А, што отвара могућност добијања препарата за вакцину.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],

Отпор вируса хепатитиса А

Вирус је релативно отпоран на високе температуре, киселине, масти раствараче (нема липида), дезинфекционих средстава, толерише низак температурни извор. Све ово доприноси дугорочној очувању у вањском окружењу. На собној температури преживљава неколико недеља, на 60 ° Ц делимично губи инфективност после 4-12 сати, потпуно - после неколико минута на 85 ° Ц. Високо отпоран на хлор, због чега је у могућности продрети у воду из чесме кроз преграде постројења за пречишћавање воде.

Сумирајући све податке, вирус хепатитиса А можемо описати на следећи начин:

• природни господар је човек;
• експерименталне животиње - мармозет, шимпанзе;
• извор инфекције - фецес;
• болест - епидемија и ендемична болест;
• пут преноса је фекално-орално;
• период инкубације - 14-40 дана;
• прелазак на хронични хепатитис - није примећен.

Имунолошка својства НАВ-а су:

• Прототипни сојеви - Мс-л, ЦР-326, ГВГ. Сви су имунолошки слични или идентични;
• Антибодије - ИгМ и ИгГ, произведени су као одговор на увођење структурних протеина вируса и заштитни су;
• И Трофичко дејство хумане серумске и-глобулина - штити или ослаби болест под условом давања пре инфекције или током периода инкубације.

Физичко-хемијске карактеристике НАУ су следеће:

• Морфологија је сферична честица без куглице са кубичном симетријом, капсид се састоји од 32 капсомера;
• Пречник је 27-30 нм;
• Густина у ЦсЦл (г / цм3) је 1,38-1,46 (отворене честице), 1,33-1,34 (зрели вирион), 1,29-1,31 (незреле вирионице, празне честице);
• Коефицијент седиментације је 156-160 одраслих вириона;
• Нуклеинска киселина - једнострука, линеарна РНА;
• Релативна молекуларна тежина - 2,25 106-2,8 106КД;
• Број нуклеотида је 6,500-8,100.

Стабилност НАВ-а у физичко-хемијским ефектима је следећа:

• Хлороформ, етер - је стабилан;
• Хлор, 0,5-1,5 мг / л, 5 ° Ц, 15 мин - парцијална инактивација;
• Хлорамин, 1 г / л, 20 ° Ц, 15 мин - потпуна инактивација;
• Формалин, 1: 4000, 35-37 ° С, 72 сата - комплетна инактивација, 1: 350, 20 ° С, 60 мин - парцијална инактивација.

Температура:

• 20-70 ° Ц - стабилно;
• 56 ° С, 30 минута - стабилно;
• 60 ° С, 12 сати - парцијална инактивација;
• 85 ° С, 1 мин - потпуна инактивација;
• Аутоклавирање, 120 ° Ц 20 минута - потпуна инактивација;
• Суха топлота, 180 ° Ц, 1х - потпуна инактивација;
• УВ, 1,1 В, 1 мин - потпуна инактивација.

Приказани подаци показују да су физичко-хемијска својства вируса хепатитиса најближи ентеровирусима. Као и други ентеровируси, ХАВ је отпоран на многе дезинфекциона средства, потпуно инактивиран неколико минута на 85 ° Ц и аутоклавиран.

Доказано је да се вирус хепатитиса А може репродуковати у примарним и трансплантационим линијама монолојне културе људских и мајмунских ћелија. Посебно активна репродукција вируса хепатитиса А у културама ин витро примећена је код употребе јетре екстраката пацијената мајмуна као почетног материјала. Међутим, треба напоменути да у свим експериментима у складу са репродукцијом хепатитис А вирус у ин витро културама напоменути дугим периодом инкубације у основне пасусима (-10 до 4 недеље), потом акумулацију вирусних материјала повећава генетских, али апсолутне вредности су веома незнатан, што даје разлог за многе истраживаче да разговарају о непотпуној репликацији вируса хепатитиса А у ткивним културама.

Сумирајући податке о репродукцији вируса хепатитиса А из некоренских култура, може се рећи да је чињеница о продуженом искуству ХАВ ин витро неспорна. Оптимални услови стабилног високог нивоа репликације вируса нису коначно идентификовани и ово ограничава проучавање његових биолошких особина, стварање извора реагенса за производњу дијагностике и дизајнирање вакцина.

Истовремено, у овој литератури налазе се и оптимистичније оцене о овом проблему. Решење свих питања везаних за култивацију вируса хепатитиса А је у блиској будућности. Током студија оптимални услови ХАВ простирање у ћелијској култури ембрионске бубрежне резус мајмунима објављених две фазе: фаза инфективног продукцију вируса (до 6-8 дана на 5. Пролазу) и фазе интензивног акумулације вирусног антигена. Такође се показује да најзначајнија акумулација вирусног антигена наступа под условима тзв. Култивације ваљака (ротирајућих боца). Овим се отвара широка могућност добијања културног антигена у великим количинама, а самим тим и појавиће се почетни материјал за припрему дијагностичких система и производњу препарата за вакцину.

Епидемиологија хепатитиса А

Хепатитис А вирус има високу патогеност за људе. Према закључку СЗО (1987), за почетак болести довољно је заразити само један вирион. Међутим, практична инфективна доза вероватно је много већа. Извор инфекције је само заражена особа. Вирус се пуштају у великим количинама са фецесима 12-14 дана пре појављивања жутице и у року од 3 недеље. Иктерични период. Значајне разлике у изолацији патогена код пацијената са иктеричном, жутицом и асимптоматским облицима хепатитиса А нису идентификоване. Метода инфекције је фекално-орално, углавном водена, а такође и путем кућних и прехрамбених рута. Метода инфекције је фекално-орално, углавном водена, а такође и путем кућних и прехрамбених рута. Главни (примарни) пут преноса вируса је вода. Такође је могуће инфицирати ваздухом. Осетљивост становништва је универзална. Најчешће су деца млађа од 14 година. Болест има изражену сезону јесење и зиме.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

Симптоми хепатитиса А

Инкубација се креће од 15 до 50 дана, у зависности од величине дозе инфицира вируса, али у просеку 28-30 дана. Једном у телу, хепатитис А вирус размножава у регионалним лимфним чворовима, у крв, а затим са ћелијама јетре и изазива дифузно акутни хепатитис који је праћена лезија хепатоцита јетре и ретикулоендотелних ћелија и смањење његових детоксикације и баријера функције. Оштећења хепатоцита настаје не због директног деловања вируса, као резултат иммунопатхологицал механизама. Најтипичнији слика хепатитиса А је акутна иктеричан циклички форма: период инкубације је продромал (преицтериц), жутица и опоравак период. Међутим, у жаришта инфекције открива велики број пацијената са симптома и аництериц облика инфекције, од којих је број доминира над иктеричан ( "ицеберг феномен").

Постинфективни имунитет је јак и дуготрајан, узрокован вирусним неутрализирајућим антителима и ћелијама имуног меморије.

Микробиолошка дијагноза хепатитиса А

Дијагноза (комплекс вирусног антигена + антитела у присуству комплемента адсорбован на еритроцитима и изазива постојеће адхезија) ДГЦ имунофлуоресцентног поступку, хемаглутинационе имуног адхезију: по разним имунолошким методама - хепатитис А (шимпанзи мармозет, бабуна, које смо, осим инфекције животиња) . Међутим, применљивост ових метода је ограничена због недостатка посебних вирусних антигена и имунофлуоресцентног реакција захтева биопсија јетре, што је непожељно. Поуздан и специфичан је метод имунолошке електронске микроскопије, али је веома тежак. Зато, док једини прихватљив метод за имунолошке реакције је имуносорбент теста чврсте фазе у облику ИПМ или РИМ, посебно у модификацији "заробљавање" од имуноглобулина М. У нашој земљи у ту сврху предложио тест система - "ДИАГ-А-ГЕО". Радни принцип овог тест система је следећи. На зидовима полистирена луноцхек сорбед прве антитела имуноглобулина класе М (антииммуноглобулини М) се затим додаје у испитиваном серуму пацијента. Ако постоји антитело класе ИгМ, они ће се везати за антитела-Ти-М, затим дода у одређени вирусни антиген (хепатитис А вирус), која се добија расте у ћелијској култури. Систем се опере и на њега се дају антивирусна антитела означена хреном пероксидазом. Ако све четири компоненте система интерагују, појављује се четверослојни "сендвич":

• антиимуноглобулини М,
• имуноглобулини М (против вируса хепатитиса А - у пацијентовом тестном серуму),
• вирусни антиген,
• антивирусна антитела означена ензимом.

Да би се открио овај комплекс, подлога за ензим се додаје лунетама. Под утицајем ензима, уништава се и формира се обојени производ. Интензитет боје може се квантитативно мерити спектрофотометром или фотоцолориметером.

Предност методе "хватања" ИгМ-а је да се антитела ове класе имуноглобулина јављају на примарном имунолошком одговору и указују на активну фазу инфекције, нестају након преноса болести. Антивирална антитела која припадају класи ИгГ, за разлику од њих, настају дуго времена после болести, обезбеђујући стечени имунитет. За детекцију вируса хепатитиса А предложена је метода сонде ДНК: комплементарна вРНА се користи као ДНК сонда.

Лечење хепатитиса А

Због чињенице да је производња интерферона поремећена вирусним хепатитисом, лечење хепатитиса А темељи се на употреби интерферона и индуктора његовог ендогеног синтезног амиксина.

Специфична превенција хепатитиса А

Раније широко примењивана серопревентион хепатитис А, коришћењем гамаглобулин није оправдано, међутим, нагласак је стављен на газдинству имунизацији, спроводи вакцинацију против хепатитиса А. У том циљу се развијају различите варијанте вакцина и већ се користе. У Русији, ефикасна вакцина против хепатитиса А добијена је 1995. Године, и сада је успешно примењена.