Бенс-Џонсов протеин

Урин здраве особе не садржи Бенс-Џоунс протеин, који је представљен лаким ланцима имуноглобулина који се детектују као резултат формирања малигних туморских процеса.

Лабораторијски тестови за присуство специфичних протеина ниске молекулске тежине су неопходни за дијагностиковање низа патолошких стања (најчешће проблема са β-имунолошким системом), као и за одређивање ефикасности примењене терапије.

У вишку, Бенс-Џонсов протеин производе плазма ћелије, креће се крвотоком и излучује се путем мокрења. Управо ово последње својство протеинских тела омогућава да се посумња на следеће болести приликом прегледа урина:

• мијелом;
• остеосарком;
• плазмоцитом;
• хронична лимфоцитна леукемија;
• лимфогрануломатоза;
• примарна амилоидоза;
• макроглобулинемија;
• идијапатска моноклонска гамопатија.

Клинички је потврђена веза између ослобађања специфичног протеина и накнадне бубрежне дисфункције изазване токсичним дејством протеинских тела на епителне структуре бубрежних тубула, што заузврат узрокује феномен дистрофије, Фанконијевог синдрома и бубрежне амилоидозе.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Бенс Џонсов протеин у урину

Присуство протеина у урину назива се протеинурија. Преренална протеинурија се схвата као присуство огромне количине нискомолекуларних протеина у урину. У овом случају нема оштећења бубрежног филтера и тубула, а нормална функција бубрега није у стању да обезбеди реапсорпцију протеинских тела. Екстраренална (лажна) протеинурија, тј. која се јавља без оштећења функције бубрега, указује на присуство инфективног или малигног процеса у организму. Протеинурија се примећује у 60-90% случајева пацијената са мијеломом. Око 20% патолошких стања је Бенс-Џонсов мијелом.

Бенс-Џоунс протеин у урину се диференцира због хуморалних померања у β-имуном систему. Појава протеинских тела повезана је са патологијом мијелома, парапротеинемијским хемобластозама, ендотелиозом, Валденстромовом макроглобулинемијом, лимфатичном леукемијом, остеосаркомима. Детекција Бенс-Џоунс протеина у урину је важан дијагностички и прогностички корак. Због своје ниске молекулске тежине, Бенс-Џоунс протеин се излучује урином, оштећујући епител бубрежних тубула, што је преплављено развојем бубрежне инсуфицијенције, што може довести до смрти. Благовремена класификација протеина према типу је такође важна: λ-протеин има већи нефротоксични ефекат од κ.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Бенс Џонсов протеински тест

Присуство протеинских тела у урину, осим серума, указује на лимфну леукемију, остеосарком или мијелом (туморски процеси коштане сржи). Бенс-Џонсов протеин, када се филтрат урина загреје на 45-60ºC, таложи се као мутни седимент који се таложи на зидовима епрувете. Даље повећање температуре до вредности кључања раствара издвојену замућеност.

Квантитативни тест за Бенс-Џонсов протеин се изводи на следећи начин:

• коришћење дела воде и дела азотне киселине као реагенса;
• стављање азотне киселине (0,5-1 мл) у епрувету са наношењем слоја исте количине урина који се тестира;
• процена резултата након 2 минута (појава танког прстена на граници течних средина указује на присуство 0,033% протеинских тела).

Посматрање прстена у облику нити захтева разблаживање урина водом у односу 1:1, појава дебелог прстена указује на потребу мешања дела урина са три дела воде, а у случају компактног прстена, део урина се разблажује са седам делова воде. Штавише, разблаживање се наставља све док се карактеристични седимент не појави у 2-3. минуту тестирања.

Количина протеина која се налази у уринској течности израчунава се множењем 0,033% са вредношћу разблажења. На пример, ако је урин разблажен 10 пута, прстен протеинских тела се појавио на крају 3. минута студије, онда се проценат укључивања протеина израчунава на следећи начин: 0,033x10=0,33.

Ако нема седимента, процењује се степен замућења - изражени, слаби или једва препознатљиви трагови замућења.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Секреција протеина Бенс Џонса

У зависности од врсте излученог имуноглобулина, разликују се:

• патологије лаких ланаца (секреција протеина Бенс-Џонса);
• гломерулопатија (секреција других имуноглобулина).

Могуће су и разне комбинације оштећења бубрега. Као што пракса показује, нефропатија је последица лимфопролиферативне патологије (мултипли мијелом, хронична лимфоцитна леукемија, Валденстромова болест итд.).

Када се ослободе у крвоток, као и сви протеини молекулске тежине до 40 kDa, лаки ланци заобилазе бубрежни филтер, а затим се разлажу на олигопептиде и аминокиселине путем лизозома. Вишак лаких ланаца изазива дисфункцију реакције катаболизма и могуће ослобађање лизозомских ензима, што повлачи за собом некрозу тубуларног ткива. Протеинска тела доводе до немогућности реапсорпције, а када се моноклонски лаки ланци комбинују са Там-Хорсфаловим протеином, у дисталним тубулама се формирају протеински цилиндри.

Бенс-Џонсов протеин код мијеломске болести

Мултипли мијелом је патолошко стање у којем тело производи лаке имуноглобулинске ланце уместо пуноправних. Дијагноза болести и праћење стања спроводе се лабораторијским тестирањем урина, које показује квантитативни садржај протеинских тела. Спецификација подтипа мијелома заснива се на анализи крвног серума. Клинички знаци болести укључују: синдром бола у костима, дисфункцију мокрења, хематоме непознатог порекла, задржавање течности у телу.

Бенс-Џонсов протеин код мијелома се детектује на основу стандардног тестирања које показује квантитативни садржај протеинских тела и процењује степен оштећења бубрега. Идентификација протеина у урину објашњава оштећење епитела склерозом бубрежне строме, што временом формира бубрежну инсуфицијенцију - чест узрок смрти као резултат оштећења мијелома (Бенс-Џонсов протеин потпуно зачепљује тубуле, спречавајући мокрење).

Статистички подаци указују да се мијелом диференцира код мушкараца старијих од 60 година, са историјом генетске предиспозиције, који пате од гојазности и имуносупресије, а такође су били изложени токсичним и радиоактивним супстанцама.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Одређивање Бенс-Џонсовог протеина

Да би се диференцирао специфичан протеин, спроводи се лабораторијска студија просечног дела јутарњег урина (потребна је запремина од најмање 50 мл). Присуство Бенс-Џонсовог протеина са одређивањем квантитативне компоненте могуће је методом имунофиксације. Раздвајање протеина се врши електрофорезом са накнадном имунофиксацијом коришћењем посебних серума. Приликом везивања протеина са антителима лаких и тешких ланаца имуноглобулина, формирају се имуни комплекси, који се процењују бојењем.

Треба напоменути да се чак и минимална концентрација протеина детектује због реакције таложења на сулфосалицилну киселину. Бенс-Џонсов протеин се одређује комбиновањем филтрираног урина (4 мл) са ацетатним пуфером (1 мл). Накнадно загревање на 60º C у воденом купатилу и држање 15 минута са позитивним узорком производи карактеристични седимент. Ова метода се сматра најпоузданијом. Прекомерно кисела или алкална средина и ниска релативна густина урина могу негативно утицати на резултате анализе.

Методе истраживања у којима се Бенс-Џоунс протеин раствара загревањем на 100º C или поново таложи након хлађења нису непоуздане, јер немају сви протеински елементи одговарајуће карактеристике. Међутим, употреба индикаторског папира је потпуно непогодна за детекцију Бенс-Џоунс протеина.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]